Introducción. La Fenilcetonuria es una enfermedad autosómica recesiva, la cual  se debe a una deficiencia de la enzima fenilalanina hidroxilasa que transforma la fenilalanina en tiroxina. Es una enfermedad progresiva severa que puede producir retraso mental si no se trata a tiempo. El gen PAH está localizado en el cromosoma 12, siendo identificadas 564 mutaciones. Teniendo en cuenta el origen étnico de la población cubana y estudios anteriores se propone la detección de las mutaciones R261Q, R252W, I65T e IVS10nt en los pacientes fenilcetonúricos. Objetivos: Identificar las mutaciones R261Q, R252W, I65T e IVS10nt y calcular la frecuencia alélica en pacientes cubanos con fenilcetonuria. Materiales y Métodos. Se realizó la extracción de ADN a 90 muestras de sangre de pacientes cubanos fenilcetonúricos. Para la detección de las mutaciones se realizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa, seguida de digestión enzimática y electroforesis. Resultados. De los 90 casos analizados,  12 resultaron  heterocigóticos y 1 homocigótico para la mutación R261Q. Se detectaron 8 pacientes heterocigóticos para la mutación R252W y ningún caso resultó homocigótico. Heterocigóticos para la mutación IVS10nt  se detectaron 10 pacientes y 1 homocigótico y con la mutación  I65T se detectaron 2 casos  homocigóticos y 6 heterocigóticos. La frecuencia alélica de las mutaciones R261Q, R252W, I65T e IVS10nt en la muestra analizada resultó ser de 7.8%, 4.4%, 6.7% y 7.8% respectivamente. Conclusiones. Las mutaciones R261Q, R252W, I65T e IVS10nt están representadas en la población cubana fenilcetonúrica y su detección permite la realización de diagnóstico prenatal en familias afectadas que así lo soliciten.