Introducción. La Anemia de Fanconi (AF) es un síndrome de inestabilidad cromosómica que se caracteriza por  diversos rasgos dismórficos y predisposición a neoplasias hematológicas, aspectos que varían entre los pacientes. Esta variabilidad fenotípica hace que el diagnóstico clínico  sea difícil. El ensayo de sensibilidad a la mitomicina C (MMC) proporciona un marcador celular único para el diagnóstico de la enfermedad. Objetivo. El estudio se realiza para  determinar con certeza la AF en pacientes con diagnóstico presuntivo. Materiales y Método. El estudio se realizó en linfocitos de  sangre periférica de  cinco  pacientes con malformaciones congénitas y/o anemia aplástica con sospecha clínica de AF procedentes de  instituciones médicas de La Habana   y cinco  sujetos  controles. La sangre se cultivó por 72 horas añadiendo 300 nM de MMC.Resultados y Discusión. A 300 nM  de MMC en los controles aparece un 32% de células con roturas(≤2 roturas/célula), que es lo esperado a esta concentración, lo  que confirma el éxito del estudio. Un  paciente con  un 98 % de roturas cromosómicas(≥10 roturas/células) y otro que presenta mosaicismo somático(40% de células con aberraciones  y más de diez roturas por célula) son diagnosticados  como AF. Ambos eran los únicos que presentaron anomalías congénitas. Conclusiones. El ensayo permite diferenciar de manera inequívoca  AF de otras anemias aplásicas adquiridas o “idiopáticas”. Este estudio refuerza la necesidad de realizar el ensayo de roturas cromosómicas para diagnosticar  AF de forma exacta con el objetivo de implementar la terapia más adecuada y mejorar la calidad de vida de estos pacientes.